Titre

Transfert d’énergie par bioluminescence ou BRET (Bioluminescence Resonance Energy Transfer).

Description

Le BRET est une technique de transfert d’énergie non radiatif utilisée pour étudier les interactions moléculaires au sein des cellules. Son principe repose sur l’utilisation d’une enzyme bioluminescente, la luciférase (Renilla, NanoLuc, Firefly…), qui agit comme un donneur d’énergie.

Lorsque la luciférase catalyse une réaction chimique, elle émet de la lumière. Si une molécule fluorescente (accepteur comme la Yellow Fluorescent Protein) est suffisamment proche du donneur, l’énergie lumineuse émise par la luciférase peut être transférée de manière non radiative à l’accepteur, ce qui provoque une émission de fluorescence à une longueur d’onde spécifique.

Ce phénomène n’a lieu que si les deux molécules sont en proximité immédiate (inférieure à 10 nanomètres), ce qui permet de détecter et de mesurer des interactions moléculaires, comme celles entre des protéines en temps réel dans un environnement cellulaire.

Applications

Le BRET a été largement utilisé depuis les années 2000 dans la recherche biomédicale pour étudier les interactions entre protéines, suivre des processus cellulaires en temps réel et développer des tests de détection de seconds messagers.

Le BRET est employé sur la plateforme pour analyser les interactions protéine-protéine dans les cellules comme les interactions entre des récepteurs couplés aux protéines G (RCPGs), la dissociation des complexes hétérotrimériques de protéines G ou le recrutement d’effecteurs au niveau des récepteurs comme les GRK (G-protein Regulating Kinases) ou les b-arrestines1/2.

En outre, le BRET permet de générer des capteurs biosensibles comme le CAMYEL (cAMP sensor using YFP-Epac-RLuc) qui est capable de détecter des changements de concentration de l’AMPc dans les cellules.